Fabio Quartararo berhasil mencatatkan waktu tercepat di hari pertama tes MotoGP Sepang, sedangkan Jorge Martin mengalami kecelakaan di atas Aprilia RS-GP dan harus dilarikan ke rumah sakit. Quartararo sebelumnya telah menjadi yang tercepat dalam Shakedown pekan lalu di sirkuit yang sama, dan keahliannya dalam menguasai lintasan baru membantunya untuk tetap memimpin saat seluruh tim berkumpul pada Rabu. Juara MotoGP 2021 ini berhasil mencetak waktu terbaik 1 menit 57,555 detik pada sesi tes tersebut, mengungguli catatan waktu terbaiknya sebelumnya dengan selisih lebih dari 0,2 detik. Quartararo berhasil mengalahkan Alex Marquez di posisi teratas, dengan selisih waktu 1:57,738 pada sesi tes tersebut. Marc Marquez, sang kakak dari Alex Marquez, juga berhasil menempati posisi terdepan dengan waktu 1:57,606 di atas motor Ducati, hanya terpaut 0,051 detik dari Quartararo.
Selain Quartararo dan Marquez, hanya sedikit pembalap yang berhasil mencatatkan waktu di bawah 1 menit 57 detik. Pembalap rookie, Fermin Aldeguer, meskipun membuat waktu lebih lambat dengan 1:58,035, berhasil menempati posisi keempat dan menjadi yang terdepan di antara rookie lainnya. Franco Morbidelli dan Joan Mir juga menunjukkan penampilan solid dengan menempati posisi keenam dan posisi berikutnya. Kedua pembalap Pramac Yamaha, Jack Miller dan Miguel Oliveira, juga berhasil masuk dalam posisi 10 besar. Johan Zarco dari LCR Honda menjadi pembalap Honda terdepan dengan mencapai posisi kesembilan.
KTM memulai tes pramusim resmi dengan hasil yang relatif sederhana, di mana Pedro Acosta memimpin rekan setimnya, Brad Binder. Francesco Bagnaia, juara dua kali MotoGP, hanya mampu menempati posisi ke-17 setelah menyelesaikan 23 lap sepanjang hari. Hari tes yang sulit juga dialami oleh Aprilia, di mana Jorge Martin mengalami kecelakaan serius dan harus dilarikan ke rumah sakit, sementara rekan setimnya, Raul Fernandez, harus mengundurkan diri dari tes karena cedera tulang kelingking tangan kirinya. Meskipun demikian, juara Moto2 2024, Ai Ogura, berhasil mencatatkan waktu tercepat ke-16 pada hari tersebut.